揮發(fā)性鹽基氮是評價寵物食品新鮮度與衛(wèi)生安全的核心指標，其含量直接反映蛋白質(zhì)類原料在加工、儲存過程中因微生物或酶解作用產(chǎn)生的腐敗產(chǎn)物（如氨、三甲胺等）。通過凱氏定氮儀測定揮發(fā)性鹽基氮含量，可精準量化此類有害物質(zhì)，為質(zhì)量管控提供科學依據(jù)。

本方案分別參照《GB 5009.228-2016食品安全國家標準 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》和《GB/T32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測定》兩種國標，使用海能K1160全自動凱氏定氮儀測定寵物食品中的揮發(fā)性鹽基氮含量。通過雙國標對比測試，揭示國標方法差異對測試結(jié)果的影響，從方法學層面為企業(yè)構(gòu)建差異化的質(zhì)控策略提供科學依據(jù)。

海能K1160全自動凱氏定氮儀、分析天平等。

甲基紅、溴甲酚綠、硼酸、氫氧化鈉、無水硫酸鉀、五水合硫酸銅、濃硫酸、氧化鎂、高氯酸。

凍干鱈魚粒、凍干蛋黃粒和魚粉、貓糧。

（1）食品國標：

稱取10 g（精確至 0.1 mg）的樣品于100 mL離心管中，加入75 mL的純水，振搖，使試樣在樣液中分散均勻，浸漬30min。隨后，將浸漬完成后的樣品進行離心(3500r/min，5min)，取10 mL，離心后的上清液轉(zhuǎn)移并至干凈的消化管中待測。

（2）飼料國標：

稱取5 g（精確至 0.1 mg）的樣品于錐形瓶中，加入高氯酸溶液40 mL，振搖30min，將試樣及試樣浸提液完全轉(zhuǎn)移至 50mL容量瓶中，并使用高氯酸溶液定容，搖勻；取 30 mL試樣浸提液于 50mL 離心管中，離心（3500r/min，5min），取10 mL離心后的上清液轉(zhuǎn)移并至干凈的消化管中待測。

（1）食品國標：

將盛有樣品濾液的消化管加入1 g氧化鎂后，立即放置于凱氏定氮儀上進行檢測，定氮儀參數(shù)設(shè)置如表1：

表1  K1160全自動凱氏定氮儀試驗參數(shù)設(shè)置

（2）飼料國標：

將盛有樣品濾液的消化管放置于凱氏定氮儀上進行檢測，定氮儀參數(shù)設(shè)置如表2：

表2  K1160全自動凱氏定氮儀試驗參數(shù)設(shè)置

注：表中氫氧化鈉溶液的濃度為40g/L。

經(jīng)上機測試，使用食品和飼料國標測得樣品中的揮發(fā)性鹽基氮含量如表3所示：

表3  樣品揮發(fā)性鹽基氮含量表

為進一步驗證兩種國標測試結(jié)果差異的原因所在，選用同一種貓糧樣品，通過單因素（控制加堿種類作為唯一變量）實驗進行探究，具體測試結(jié)果如表4：

表4  貓糧樣品的揮發(fā)性鹽基氮含量表

注：實驗結(jié)果計算過程中（根據(jù)10 mL濾液的滴定體積進行反推，進而得到全部樣品的揮發(fā)性鹽基氮含量），食品國標方法中所乘的稀釋倍數(shù)為7.5，飼料國標所乘稀釋倍數(shù)則為5。

（1）食品國標中，樣品浸提完畢后，通過離心取部分濾液的方式，可有效改善樣品蒸餾過程的沸騰上沖問題。另外，相較于取全部濾液，取部分濾液的方式測試結(jié)果更準確（全部濾液移取過程，會有部分濾液無法移出）。

（2）飼料國標中規(guī)定的氫氧化鈉溶液濃度為40 g/L，建議測試前需提前準備好相應濃度的氫氧化鈉溶液。氫氧化鈉濃度不同也會影響揮發(fā)性鹽基氮含量的測試結(jié)果，氫氧化鈉濃度為400 g/L時，會導致測試結(jié)果顯著高于40 g/L氫氧化鈉溶液。

1、表3測試結(jié)果表明，凱氏定氮儀能夠有效測定寵物食品中揮發(fā)性鹽基氮的含量，測試精度均符合《GB 5009.228-2016 食品安全國家標準 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》和《GB/T 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測定》國標的要求。

2、表4驗證實驗結(jié)果表明，在兩種標準下，使用氫氧化鈉的測定結(jié)果相近，使用MgO的測定結(jié)果也相近。另外，相同樣品在相同標準下，堿種類不同會導致?lián)]發(fā)性鹽基氮測定值存在顯著差異，其中氫氧化鈉的測定值顯著高于MgO。

綜上，通過使用《GB 5009.228-2016 食品安全國家標準 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》和《GB/T 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測定》兩種國標對比發(fā)現(xiàn)，相同樣品下，飼料國標測試結(jié)果高于食品國標。這可能是因為相比于食品國標中加入的MgO，飼料國標加入的氫氧化鈉其堿性更強可能會導致部分含氮有機物過度水解或破壞進而導致測試結(jié)果高于食品國標，兩種國標方法的不同進而導致測試結(jié)果的不同。

參考標準

【1】《GB 5009.228-2016 食品安全國家標準 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》

【2】《GB/T 32141-2015 飼料中揮發(fā)性鹽基氮的測定》